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    熒光定量PCR耗材的使用和選擇注意事項
    發布時間:2022-03-29瀏覽:91次

      熒光定量PCR耗材的使用和選擇注意事項


      PCR板

      PCR板是一種在聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction ,PCR)中主要作為參與擴增反應的引物、Taq DNA聚合酶、dNTP、模板核酸、Mg、緩沖液等的承載物。

      PCR板材質

      其本身材質在當今主要以聚丙烯(PP)為主,能更好適應PCR反應過程中反復高低溫設定,并且能夠實現高溫高壓滅菌操作。為配合排槍、PCR儀等實現高通量操作,較常使用的為96孔或384孔的PCR板。板型符合SBS國際標準,且為適應不同廠家的PCR儀,根據裙邊設計又可分為無裙邊、半裙邊、升裙邊和全裙邊四種設計模式。

      PCR板常見顏色

      有透明和白色,其中白色更適合用于新型的實時熒光定量PCR。

      PCR板用途

      廣泛應用于遺傳、生化、免疫、醫藥等領域,不僅應用于基因分離、克隆和核酸序列分析等基礎研究,還可用于疾病的診斷或任何有DNA,RNA的地方,屬于實驗室一次性易耗品。

      如何正確使用96孔PCR孔板

      PCR板有透明和乳白色可選,其中乳白色更適合用于頂部采集熒光信號的新型熒光定量PCR儀(如伯樂CFX系列,ABI 7500fast 以上型號, Roche 480系列),但如果熒光定量PCR儀是底部光源的,則應選擇透明的。

      PCR板根據裙邊設計又可分為無裙邊、半裙邊和全裙邊三種設計模式,不同廠家的熒光定量PCR儀會設計不同的切角或邊緣凸起,請選擇適合該PCR儀的板子。

      PCR板又分100ul體積(矮板)和200ul體積(高板),根據機型的不同選擇,選擇不同高度孔板,避免高度錯誤對機器造成破壞和加熱不均導致數據失真。

      當使用96孔板做熒光定量PCR實驗的時候,推薦使用光學膜代來密封反應孔。正確的封膜方法是:先沿著96孔板的縱向壓膜,然后橫向,最后沿著板的邊緣按壓使之密封。具體手法見下面圖示:

      加樣后會在管壁上飛濺一些小液滴,另外反應體系內也會有一些氣泡,需要離心去掉掛壁液滴和氣泡。請使用專用的微孔板離心機解決上述問題。

      PCR板屬于一次性消耗品,生產一次成型,不建議剪開使用容易造成實驗誤差增加,不能清洗或部分重復利用。不要為了節省一點小錢,而給實驗帶來后續分析上的困擾。

      熒光定量PCR耗材的使用和選擇注意事項,先和大家介紹到這,如果想要了解更多熒光定量PCR耗材的信息,可以關注天津本生生物,專業給生物行業客戶提供生物實驗室檢測耗材,歡迎廣大客戶來詢。


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